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直面外泌體純化挑戰,切向流過濾如何勝出

更新時間:2023-11-27      點擊次數:1174

近年來,醫美界新刮起一陣外泌體風潮,作為醫美新寵,外泌體更被喻為“抗衰圣品"。同樣科學界對外泌體也是大力追捧,無論是基礎研究還是技術開發都呈現指數上升。研究方向百花齊放,外泌體可作為診斷標志物,獲取疾病相關信息的試驗診斷,比如腫瘤早期診斷、療效的預后評估;作為治療制劑,對其攝取臟器具有治療作用,甚至可以通過工程改造來增加其藥用范圍。作為藥物遞送工具,可以通過對外泌體內外蛋白進行修飾及藥物攜載,以提高其靶向性及遞送效率。


外泌體提取和純化

外泌體的分離多采用超速離心、磁珠免疫捕獲、沉淀或過濾幾種方法,這些方法僅適用于前期研究,對于后期工藝放大難以滿足,限制了規?;a藥品級外泌體治療產品供臨床使用。致使有效的外泌體提取和純化工藝技術成為外泌體治療市場的一個關鍵技術阻礙。


外泌體的挑戰

外泌體純化對大規模工業生產提出的技術挑戰主要來自于其結構與環境間相互作用,它們的脂質包膜使它們容易受到多種作用力的影響。pH值會改變能夠穩定外泌體包膜的靜電和金屬親和作用,表面活性劑和有機溶劑也可以破壞脂質成分,過高的糖和鹽濃度會通過滲透性休克誘導結構損傷。外泌體包膜的結構大且脆弱,容易受到剪切力的影響。所有這些特點限制了適用于外泌體純化的方法條件范圍。

切向流過濾技術在外泌體純化的應用

目前市場上出現了一種探索,借鑒細胞治療中病毒載體的純化工藝的技術措施,采用切向流過濾技術進行濃縮和洗濾。同樣是不耐受高剪切力的大生物分子,同樣面臨工藝線性放大摸索的技術難題,切向流技術顯然是很好的解決思路。外泌體能耐受不高于4000s-1的剪切力,利用切向流過濾技術,保持剪切力不變,可以通過放大膜面積來實現線性放大的工藝需求。

對于剪切力敏感的樣本,選擇一款帶有數據監控的自動化設備顯然是很有必要的??梢詫崟r監控壓力情況、剪切力情況,尤其是在研發階段的工藝摸索,可以降低條件摸索的復雜性,操作的簡便性,可以縮短整個工藝開發的時間,無形的降低了研發成本。

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